SURFE2R N1 生電轉運體分析儀

絕佳資料品質

  • 即時資料–非單點讀取
  • 高信號放大–對比於膜片鉗
  • 可分析快速結合動力學

量測快速方便

  • 免標籤電性量測
  • 自動化記錄及分析
  • 每一感測器僅需0.1~1μg膜蛋白
  • 每天150資料點!

適合廣泛靶體

  • > 100 靶體業經測試
  • ~ 100 同儕審查文獻
  • 轉運體、離子泵及離子通道
  • 原生膜或蛋白脂質體
  • 靈活彈性之實驗設計

可量測哪些靶體?
SURFE2R技術挾其高靈敏度優勢,可探究因離子穿膜移位而產生淨電荷之生電(electrogenic)膜蛋白。截至目前為止,利用固體支撐膜(SSM)電生理技術已研究過100種以上靶體,包括共轉運體(symporter)、交換體(exchanger)、單轉運體
(uniporter)、離子泵及離子通道。此外,這方法已用來進行光敏視紫質(rhodopsin)特性分析;甚至只要部分反應能導致離子穿膜移位而生電者,也能用來分析電中性轉運體。

可獲得哪些資訊?
利用SURFE2R技術所進行之轉運體特性分析,涉及檢測不同基質之相對Vmax值及表觀KM米氏常數值。可進行不同抑制分析,或作為控制實驗,抑或用來判定半最大抑制濃度IC50值。至於質子偶聯轉運體(PCT)則進行pH評估。有許多參數可供探究,包括濃度梯度或膜電位造成之影響;轉運相對於結合信號之測定;比率常數之計算;化學計量及整體動力學轉運模式。此外,SURFE2R技術也可用來比較異形體(isoform)、同系物(homologue)、突變(mutation)或液體環境之變異。

工作原理為何?
內含欲探究之蛋白的膜標本被吸附至鍍金感測晶片上之固體支撐膜(SSM)。來自高達1000個細胞之蛋白可被加注至3mm電極,從而產生增強之信號。欲探究之蛋白藉快速液體交換而予激活。就生電轉運體而言,這生成了可透過電容耦合而從電極量測之膜電位。此暫態電流之大小及形狀可特性分析以轉運體類型、基質濃度及其他不同化驗條件。峰值電流正比於轉換率且對分析至關重要!

如何進行量測?
SURFE2R技術可使用來自原生組織或培養細胞之隔離膜囊泡、重組之蛋白脂質體甚或細胞器或全細胞之蛋白。僅需小量之胞膜:每感測器約1μg蛋白。日常工作流程始於準備感測晶片。通常一次同時準備多個感測器。首先硫醇化金感測器,接著運用SSM並吸附胞膜/脂質體。每次量測僅費時2分鐘,因此每天可在多個感測器上以不同分析條件進行測試。

“SURFE2R讓極限挑戰電生理靶體成為穩健之常規分析。例如,我們已開發出分析法,利用來自加州Pacific公司之胞膜,來研究尼古丁乙醯膽鹼受體離子通道。藉此方法,我們克服了牽扯此離子通道而為大家所熟知之許許多多困難,讓我們高效地獲得化合物藥理學有關資訊。得到之藥理學數值極其吻合得自膜片鉗記錄之結果。我們發現SURFE2R係利用離體胞膜來進行生電過程特性分析之絕佳平台。”

Karin V. Niessen, Dr. Thomas Seeger,
Bundeswehr Institute of Pharmacology and Toxicology, Munich, Gemany

“SSM立基之電生理係1990年代早期在我們的實驗室所開發出來並廣為人知之技術,用來探究生電膜轉運體。它適用於廣大範圍之樣本,從哺乳動物細胞膜到微生物囊泡,再到蛋白脂質體。SSM立基之電生理特別有用於無法使用傳統電生理之案例,諸如位於小微生物細胞內膜或漿膜之轉運體。SURFE2R係SSM立基之商用電生理儀器,促進膜轉運領域之基礎研究。”

Prof. Dr. Klaus Fendler
Max-Planck Institute of Biophysics, Frankfurt, Germany

SSM立基之電生理:研究焦點舉例

業經驗證之靶體選單